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使用紫外可見分光光度計(jì)時(shí)如何進(jìn)行參數(shù)條件的選擇

點(diǎn)擊: 次 時(shí)間:2017-08-31 10:44

    紫外可見分光光度計(jì)常見技術(shù)參數(shù)包括波長、狹縫寬度、吸光度等,在使用時(shí)如何選擇這些工作參數(shù)呢?
1、測量波長  
    在定量分析中,為了提高測定的靈敏度,入射光的波長應(yīng)選擇被測物的最大吸收波長λmax,如果λmax有干擾,可選擇另一條靈敏度稍低、但能避免干擾的譜線。所以,適當(dāng)選擇入射光的波長,不僅能提高測定的靈敏度,還能提高測定的準(zhǔn)確度。
2、狹縫寬度  
    狹縫寬度過大,入射光的單色性差;狹縫寬度太小,入射光的強(qiáng)減弱。狹縫寬度過大或過小均會(huì)造成靈敏度降低,最佳選擇是產(chǎn)生最小誤差情下的最大狹縫。
    一般選用儀器的狹縫寬度應(yīng)小于待測樣品吸收帶的半寬度,否則測得的吸光度值會(huì)偏低。
    狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸光度不再加為準(zhǔn)。對(duì)于大部分被測品種,可以使用2nm縫寬。
3、控制適當(dāng)?shù)奈舛确秶?nbsp;
    可通過控制被測物濃度或改變吸收池厚度來實(shí)現(xiàn)吸光度合理的范圍,以盡量減小測量誤差。
    一般吸光度盡量控制在0.1-0.8范圍。
4、空白溶液的選擇 
    空白溶液是用來調(diào)節(jié)吸光度測量工作零點(diǎn),即A=0,T=100%的溶液,以消除溶液中其它基體組分以及吸收池和溶劑對(duì)入射光的反射和吸收所帶來的誤差。根據(jù)情況不同,常用的空白溶液有如下幾種選擇:
①溶劑空白
 當(dāng)溶液中只有待測組分在測定波長下有吸收,而其它組分無吸收時(shí),可用純?nèi)軇┳骺瞻住?nbsp;
②試劑空白  
如果顯色劑或其它試劑有吸收,而待測試樣溶液無吸收,則用不加待測組分的其它試劑作空白。
③試樣空白
 如果試樣基體有吸收,而顯色劑或其它試劑無吸收,則用不加顯色劑的試樣溶液作空白。
(內(nèi)容來源上分官網(wǎng))
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